3種結(jié)腸癌細(xì)胞株中DLC-1基因的表達(dá)及其啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài)研究

目的:研究候選抑癌基因DLC-1在結(jié)腸癌細(xì)胞株中的表達(dá)及其啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài),初步探討結(jié)腸癌細(xì)胞株DLC-1基因表達(dá)水平與其啟動子區(qū)甲基化的相關(guān)性.方法:采用RT-PCR技術(shù)分別檢測DLC-1基因在人結(jié)腸癌細(xì)胞株CaCo-2、HT-29和LoVo中的表達(dá)水平;應(yīng)用甲基化特異性PCR(MSP)方法和亞硫酸氫鹽修飾DNA測序檢測啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài);分別用0、5、10 μmol·L-1濃度的去甲基化藥物5氮雜胞苷處理DLC-1基因啟動子區(qū)域高甲基化狀態(tài)細(xì)胞后,再檢測DLC-1基因mRNA表達(dá)水平.結(jié)果:人結(jié)腸癌細(xì)胞株CaCo-2和LoVo中DLC-1 mRNA呈陽性表達(dá),HT-29中的表達(dá)呈陰性表達(dá);CaCo-2和LoVo細(xì)胞DLC-1基因啟動子區(qū)域未發(fā)生甲基化,而HT-29出現(xiàn)啟動子區(qū)高甲基化狀態(tài);經(jīng)5氮雜胞苷藥物干預(yù)后,HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞的DLC-1基因表達(dá)明顯增強(qiáng).結(jié)論:結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29中DLC-1基因表達(dá)沉默與啟動子區(qū)高甲基化狀態(tài)有關(guān).

作 者： 金月玲 田小強(qiáng) 商延芳 黃培林 JIN Yue-ling TIAN Xiao-qiang SHANG Yan-fang HUANG Pei-lin   作者單位： 東南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,病理學(xué)與病理生理學(xué)系,江蘇,南京,210009  刊 名： 東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2008 27(1)  分類號： Q754  關(guān)鍵詞： DLC-1基因   甲基化   結(jié)腸癌細(xì)胞株   甲基化特異性PCR  

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