pSITITIN載體的構(gòu)建及表達(dá)

目的構(gòu)建能阻斷Wistar大鼠肌聯(lián)蛋白表達(dá)的siRNA載體,為研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌細(xì)胞分化的過(guò)程中肌小節(jié)結(jié)構(gòu)蛋白之間的相互關(guān)系打下基礎(chǔ).方法針對(duì)Wistar大鼠TITIN N2B區(qū)設(shè)計(jì)并構(gòu)建重組質(zhì)粒pSITITIN,針對(duì)人β-ACTIN設(shè)計(jì)并構(gòu)建重組質(zhì)粒pSIACTIN,利用陽(yáng)離子脂質(zhì)體將其分別轉(zhuǎn)染入體外培養(yǎng)1周的新生大鼠心肌細(xì)胞和經(jīng)5-氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza)誘導(dǎo)后2周的MSCs中,免疫熒光檢測(cè)肌聯(lián)蛋白的表達(dá).結(jié)果重組質(zhì)粒pSITITIN轉(zhuǎn)染入正常心肌細(xì)胞和經(jīng)5-aza處理后的MSCs后,肌聯(lián)蛋白的表達(dá)均減弱(P＜0.01);而轉(zhuǎn)染pSIACTIN后不影響肌聯(lián)蛋白的表達(dá).結(jié)論 pSITITIN具有確切阻斷肌聯(lián)蛋白表達(dá)的效果.

作 者： 張小飛 陳沅 田杰 ZHANG Xiao-fei CHEN Yuan TIAN Jie   作者單位： 重慶醫(yī)科大學(xué)兒童醫(yī)院心血管內(nèi)科,重慶,400014  刊 名： 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE  年，卷(期)： 2006 28(7)  分類號(hào)： Q782 R394-33 R394.2  關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞   RNA干擾   肌聯(lián)蛋白  

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