來(lái)源于檸檬酸桿菌的高比活植酸酶基因在畢赤酵母中的高效表達(dá)

檸檬酸桿菌(Citrobacter braakii)來(lái)源的植酸酶是目前報(bào)道的比活最高的植酸酶.按照畢赤酵母(Pichia pastoris)對(duì)密碼子的選擇偏向性,對(duì)來(lái)源于檸檬酸桿菌的高比活植酸酶基因AppA 進(jìn)行了密碼子優(yōu)化改造.改造后的基因AppA(m)按正確的閱讀框架融合到畢赤酵母表達(dá)載體pPIC9的α-因子信號(hào)肽編碼序列3′端,通過(guò)電擊轉(zhuǎn)化得到重組轉(zhuǎn)化子.通過(guò)PCR驗(yàn)證,AppA(m)已整合在酵母染色體上.SDS-PAGE分析和表達(dá)產(chǎn)物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表達(dá),在5L發(fā)酵罐中植酸酶蛋白表達(dá)量達(dá)到3.2mg/mL發(fā)酵液,發(fā)酵效價(jià)達(dá)到每毫升發(fā)酵液1.4×107IU以上,高于目前報(bào)道的各種植酸酶基因工程菌株的發(fā)酵效價(jià).

作 者： 黃火清 羅會(huì)穎 柏映國(guó) 王亞茹 姚斌 孟昆 袁鐵錚 楊培龍   作者單位： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所,北京,100081  刊 名： 微生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 46(6)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 高比活植酸酶   基因改造   畢赤酵母   高效表達(dá)  

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