生物發(fā)光法微生物快速檢測試劑的性質(zhì)及其影響因素研究

研究了ATP生物發(fā)光微生物快速檢測試劑的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)、反應(yīng)最適溫度、pH以及各種影響因素.在ATP生物發(fā)光反應(yīng)中,測試系統(tǒng)中D-熒光素用量為40～50μg/mL時(shí)對反應(yīng)已經(jīng)足夠;發(fā)光脈沖計(jì)數(shù)CPM值隨反應(yīng)時(shí)間的延長不斷降低,開始的1min內(nèi),其CPM值下降最快,然后下降速度不斷減緩;反應(yīng)的最適溫度為24℃～25℃;而體系的最佳pH為7.2～7.4.配制好的發(fā)光試劑溶液置于4℃保存45h,可以保持86%的活力,在25℃時(shí)保溫1h,活力下降較少,隨時(shí)間的增加,活力逐漸下降,到6.5h時(shí),僅剩53.5%的活力,而在33℃時(shí),隨著保溫時(shí)間的延長,酶活力下降較快,保溫1.5h,活力剩下59.1%,因此保存溫度對發(fā)光試劑活力的影響非常大.各種化學(xué)物質(zhì)如酸、堿、鹽及表面活性劑都會抑制ATP發(fā)光反應(yīng),當(dāng)NaCl濃度達(dá)到1.5g/L時(shí),即可以抑制52.5%的發(fā)光,TritonX-100及酸、堿對系統(tǒng)均有一定的影響,CTAB、SDS及TCA則嚴(yán)重抑制發(fā)光反應(yīng).

作 者： 張菊梅 吳清平 李程思 吳慧清 ZHANG Ju-Mei WU Qing-Ping LI Cheng-Si WU Hui-Qing   作者單位： 張菊梅,ZHANG Ju-Mei(廣東省微生物研究所廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510070;中國科學(xué)院南海海洋研究所,廣州,510301;中國科學(xué)院研究生院,北京,100049)

吳清平,李程思,吳慧清,WU Qing-Ping,LI Cheng-Si,WU Hui-Qing(廣東省微生物研究所廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510070) 

刊 名： 微生物學(xué)通報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： MICROBIOLOGY  年，卷(期)： 2006 33(3)  分類號： Q93  關(guān)鍵詞： 生物發(fā)光   微生物   快速檢測試劑   性質(zhì)   影響因素  

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