木瓜凝乳蛋白酶的單甲氧基聚乙二醇化學(xué)修飾及其對(duì)酶活力和抗原性的影響

目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的單甲氧基聚乙二醇(mPEG)化學(xué)修飾對(duì)酶活力和抗原性的影響,為該酶的修飾改性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法在底物保護(hù)和無(wú)底物保護(hù)下,分別以單甲氧基聚乙二醇的兩種活化產(chǎn)物mPEG1和mPEG2對(duì)木瓜凝乳蛋白酶進(jìn)行共價(jià)修飾,以三硝基苯磺酸法測(cè)定各修飾酶的平均氨基修飾度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE為底物分別測(cè)定各修飾酶的酶活性;以ELISA法檢測(cè)各修飾酶的抗原性.結(jié)果①mpEG1和mPEG2修飾均能降低及消除酶的抗原性,其中mPEG2的效果更為明顯.②二者的化學(xué)修飾均使酶活力有所下降,其中mPEG1修飾酶的酶活力(分別以酪蛋白和BAEE為作用底物,下同)均高于mPEG2修飾酶的酶活力(尤其是當(dāng)?shù)孜餅榇蠓肿拥鞍踪|(zhì)時(shí)).③底物保護(hù)下的修飾酶酶活力均顯著高于無(wú)底物保護(hù)的酶活力.結(jié)論以mPEG1為修飾劑,在底物保護(hù)下的Cp修飾能在消除抗原性的同時(shí),獲得仍具較高酶活力的修飾酶.

作 者： 舒薇 房師松 崔堂兵 郭勇 Shu Wei Fang Shi-song Cui Tang-bing Guo Yong   作者單位： 舒薇,Shu Wei(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)測(cè)試中心,廣州,510642)

房師松,Fang Shi-song(深圳市疾病預(yù)防控制中心)

崔堂兵,郭勇,Cui Tang-bing,Guo Yong(華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院) 

刊 名： 衛(wèi)生研究  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH  年，卷(期)： 2006 35(3)  分類(lèi)號(hào)： Q814 Q556.9 R446.6  關(guān)鍵詞： 木瓜凝乳蛋白酶   單甲氧基聚乙二醇(mPEG)   化學(xué)修飾   酶活力   抗原性  

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