人內(nèi)皮抑素抗腫瘤相關(guān)肽基因的克隆表達及活性研究

目的 克隆并表達人內(nèi)皮抑素抗腫瘤相關(guān)肽,檢測其生物活性.方法 人工合成人內(nèi)皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改為RGDRGD)所對應(yīng)的核苷酸序列,連接到質(zhì)粒pTYB2中,再轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21(DE3)中表達,幾丁質(zhì)親和層析樹脂一步純化30肽.通過MTT法、雞胚絨毛尿囊膜(CAM)實驗、小鼠體內(nèi)抑瘤實驗比較30肽和內(nèi)皮抑素抗腫瘤活性.結(jié)果 MTT證實30肽體外對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)、胃癌7901細(xì)胞(SGC-7901)半數(shù)抑制濃度IC50為36 μg/ml、47μg/ml,顯著低于內(nèi)皮抑素IC50179μg/ml、202 μg/ml.CAM實驗中30肽對血管的抑制作用更強.30肽在小鼠體內(nèi)抑瘤率47.8%,效果優(yōu)于內(nèi)皮抑素28.7%.結(jié)論 30肽具有更強抗腫瘤活性,有可能成為治療腫瘤的一種新藥物.

作 者： 李丹 劉興漢 趙煒明 李冀宏 馬洪星 張宇雯 栗亞 LI Dan LIU Xinghan ZHAO Weiming LI Jihong MA Hongxing ZHANG Yuwen LI Ya   作者單位： 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,黑龍江省生物醫(yī)藥工程重點實驗室--省部共建國家重點實驗室培育基地,哈爾濱市,150081  刊 名： 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2007 4(6)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 內(nèi)皮抑素   RGD序列   克隆   基因表達   抗腫瘤活性  

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