人類原始生殖細(xì)胞的體外培養(yǎng)

為了探討人原始生殖細(xì)胞(primordial germ cells,PGCs)的體外分離培養(yǎng)條件及相關(guān)影響因素,以小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)作為飼養(yǎng)層,室溫下用1.25 g/L胰蛋白酶+0.2 g/L EDTA消化人胚胎組織5～9 min,或用1 g/L膠原酶(Ⅳ型)消化20～40 min,分離得到PGCs,然后用不同培養(yǎng)液培養(yǎng),從培養(yǎng)液角度較為系統(tǒng)的研究原代培養(yǎng)人原始生殖細(xì)胞的條件.結(jié)果表明,在KSR培養(yǎng)液(體積分?jǐn)?shù)15 % Knockout serum replacement+高糖DMEM+10 ng/mL人重組白血病抑制因子(LIF)+4 ng/mL人重組堿性成纖維細(xì)胞生長因子+10 ng/mL Forskolin)和STO(建系的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)條件培養(yǎng)液中培養(yǎng)的原代人原始生殖細(xì)胞,有較高的克隆形成率;培養(yǎng)液中添加不同質(zhì)量濃度的LIF對克隆形成率影響差異不大.

作 者： 于海生 華進(jìn)聯(lián) 王洪鋒 楊煒峰 劉勝 蔣會婷 竇忠英 YU Hai-sheng HUA Jin-lian WANG Hong-feng YANG Wei-feng LIU Sheng JIANG Hui-ting DOU Zhong-ying   作者單位： 西北農(nóng)林科技大學(xué),國家干細(xì)胞工程技術(shù)研究中心陜西分中心,陜西,楊凌,712100  刊 名： 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 34(2)  分類號： Q813.1+1  關(guān)鍵詞： 原始生殖細(xì)胞   胚胎干細(xì)胞   白血病抑制因子   條件培養(yǎng)液   人  

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