人紅細胞血型糖蛋白GYPC的克隆與表達

目的:克隆人紅細胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,構(gòu)建GYPC重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,以獲得穩(wěn)定表達GYPC的L929細胞.方法:RT-PCR擴增入GYPC基因,克隆入T載體后,將GYPC雙酶切亞克隆入逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pEGZ,用此重組載體轉(zhuǎn)染L929細胞,Zeocin篩選得到陽性克隆;用RTPCR及流式細胞術等方法對重組載體進行鑒定.結(jié)果:克隆了人GYPC基因,并獲得穩(wěn)定表達GYPC的L929細胞系.結(jié)論:應用基因工程技術,成功構(gòu)建了含人GYPC基因重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和穩(wěn)定表達人GYPC的細胞株,建立了紅細胞血型抗原的異源表達系統(tǒng),為血清中抗GYPC特異性抗體的檢測及GYPC單克隆抗體的制備和研究奠定了基礎.

作 者： 陳琦 洪光 劉進 李厚達   作者單位： 陳琦(揚州大學,醫(yī)學院生理學教研室,江蘇,揚州,225001;揚州大學,比較醫(yī)學中心,江蘇,揚州,225001)

洪光,劉進,李厚達(揚州大學,比較醫(yī)學中心,江蘇,揚州,225001) 

刊 名： 細胞與分子免疫學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分類號： Q786  關鍵詞： 血型糖蛋白C   逆轉(zhuǎn)錄病毒   轉(zhuǎn)染   基因表達  

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