醫(yī)學(xué)碩士研究生開題報(bào)告

　　研究課題名稱

　　硫化氫在大鼠燒傷休克后應(yīng)激反應(yīng)中的作用

　　一、研 究 內(nèi) 容 和 意 義

　　探討大鼠重度燒傷休克后氣體信號(hào)分子硫化氫(h2s)血清中的變化對(duì)燒傷休克后早期應(yīng)激反應(yīng)的影響，主要表現(xiàn)為血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))和大鼠心率、血壓的變化，為重度燒傷早期的休克應(yīng)激反應(yīng)引入新的理論機(jī)制，為燒傷后抗休克治療尋找新的研究方向。78只雄性sd大鼠，隨機(jī)分為非燒傷組和燒傷組。燒傷組又分為單純燒傷組、nahs組、ppg組。燒傷組大鼠制成30%三度燙傷后，在6h、12h、24h、48h、96h各時(shí)項(xiàng)點(diǎn)采集血清。采用敏感硫電極法測定血清h2s濃度，采用試劑盒分析儀分析血清中血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))變化，采用16道生理指標(biāo)測量儀測定大鼠心率、血壓。單純燒傷組血清硫化氫濃度較非燒傷組明顯升高。單純燒傷組、nahs組、ppg組兩兩比較均有差異。燒傷后大鼠不同時(shí)期血清硫化氫濃度不同。不同硫化氫濃度下血管活性物質(zhì)表達(dá)不同。硫化氫可能參與并抑制燒傷休克后應(yīng)激過程，為重度燒傷后抗休克治療提出新的研究方向。

　　二 、選題依據(jù)

　　闡述該選題的研究意義，分析和該研究課題有關(guān)的國內(nèi)外研究概況和發(fā)展趨勢。

　　近年來研究發(fā)現(xiàn)，生理濃度的硫化氫(hydrogensulfide，h2s)具有多種的生理功能，與氣體分子 no、co在部分生物學(xué)功能方面相同或相似，因此它被看作體內(nèi)第三種的氣體信號(hào)分子 ，在多個(gè)系統(tǒng)中具有重要的病理生理學(xué)意義，已成為國內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。研究已發(fā)現(xiàn)它在高血壓、缺氧性肺動(dòng)脈高壓等疾病的發(fā)病過程中具有重要的作用。然而對(duì)疾病情況下的 h2s作用的認(rèn)識(shí)則剛剛起步。本實(shí)驗(yàn)通過外源性h2s干預(yù)燒傷后大鼠，觀測大鼠重度燒傷休克后早期應(yīng)激反應(yīng)中兩種血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))和大鼠心率、血壓的變化，從而進(jìn)一步了解硫化氫在重度燒傷休克后早期應(yīng)激過程中的作用。

　　2、國內(nèi)外主要參考文獻(xiàn)(列出作者、論文名稱、期刊名稱、出版年月)

　　rawlinson a.nitric oxide，inflammation and acute burn injury.burns.XX.29：631640.

　　盛志勇，郭振榮.危重?zé)齻�治療與康復(fù)學(xué).北京：科學(xué)出版社。XX：180183.

　　marius g.deane，annie sablotzki，andreas hoffmann et a1.a1- iterations of acute phase reaction and cytokine production in pa tents following severe burn injury.burns，XX 28(6)：535 542.

　　陳曉東，王順賓，江瓊，等.內(nèi)毒素對(duì)嚴(yán)重?zé)齻�后�?xì)胞因子、可溶性粘附分子及 sfas/sfasl的影響.中華急診醫(yī)學(xué)雜志，XX，13(7)：470-473.

　　阮晶華，王燕.宋克征等血清中clip濃度測定的臨床價(jià)值.中國醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，XX，5(1)：6264.

　　于方治.c一反應(yīng)蛋白與心血管疾病.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1999， 14(5)：264265.405.

　　蘇贊彩，王優(yōu)，唐蘭芬.環(huán)孢素對(duì)哮喘大鼠c一反應(yīng)蛋白、轉(zhuǎn)化生長因子一b 、基質(zhì)金屬蛋白酶類及其抑制劑表達(dá)的影響. 實(shí)用兒科臨床雜志，XX，21(16)：10781079.

　　單 英，鄭成中，秦 炯，等.缺氧缺血性腦病新生兒血清超敏 c反應(yīng)蛋白與血小板參數(shù)的變化及其臨床意義 .實(shí)用兒科臨床雜志，XX，21(12)：751-752.

　　付紅敏，王劍鋒，李平，等.非感染性疾病致全身炎癥反應(yīng)綜合征患兒血 c反應(yīng)蛋白、vw 因子的變化.實(shí)用兒科臨床雜志 ，XX，21(12)：743，776.

　　jaye dl，waites kb.clinical applications of creactive protein in

　　pediatrics.pediatr infect dis j，1997，16(8)：735-746.

　　范友芬，許小敏.嚴(yán)重?zé)齻�患者早期血�?c反應(yīng)蛋 白的變化 .浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，XX，11(1)：25.

　　胡榮，劉友生.全身性炎癥反應(yīng)綜合征的研究進(jìn)展.中華燒傷雜志， XX.16：313315.

　　袁建成，肖光夏.腫瘤壞死因子 mrna在嚴(yán)重燙傷大鼠小腸中的表達(dá)及細(xì)胞定位的研究 .中華整形燒傷外科雜志，1996，12：163

　　kerr me，bender cm，monti ki.an introduction to ox. ygen free radicals.heart lung，1996;25：200

　　楊紅明，盛志勇，等 .嚴(yán)重燙傷大鼠延遲復(fù)蘇后多器官損傷機(jī)制中的氧 自由基作用 .中華整形燒傷外科雜志， 1995，1 1：106

　　王平,張建新,李蘭芳,等.硫化氫對(duì)大鼠內(nèi)毒素性急性肺損傷的影響. 中國藥理學(xué)通報(bào)，XX,24(9)：12321236.

　　呂海建，盂宏，方向京，等.重組人生長激素治療嚴(yán)重?zé)齻�患者的研�?中國基層醫(yī)藥，XX，13(1)：54-55.

　　sies h，sharov vs，klotz lo，et al：glutathione peroxi. dase protects against peroxynitritemediated oxidationsa new function for selenoproteins as peroxynitrite reduetase.j biol chem 1997：272：27812

　　cetinkale 0，senei o.bulun rthe efect of antioxi dant therapy oncellmediated：immunity following bum injury in an animal mod el bums，1999，25：113

　　三 、研究內(nèi)容、創(chuàng)新之處

　　1、選題的目的、研究內(nèi)容：

　　硫化氫作為第三種氣體信號(hào)分子應(yīng)用于各領(lǐng)域的多方面研究，并得出可觀的研究成果。氣體信號(hào)分子具有多種病理生理作用。近年來，不少研究人員紛紛開始了氣體信號(hào)分子在燒傷中，尤其重度燒傷后全身應(yīng)激反應(yīng)中作用的研究。并取得具有一定價(jià)值的研究結(jié)果。目前，氣體信號(hào)分子尤其是硫化氫在燒傷方面的研究尚且不足，有待做出更多的相關(guān)研究。以更多了解硫化氫等在燒傷休克應(yīng)激反應(yīng)中的應(yīng)用價(jià)值。

　　本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用大面積燒傷大鼠模型 ，通過對(duì)外源性硫化氫干預(yù)重度燒傷大鼠對(duì)血清中血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))表達(dá)的影響和大鼠心率血壓的改變，探討其與燒傷休克后應(yīng)激反應(yīng)的關(guān)系，為臨床嚴(yán)重?zé)齻�后抗休克治療尋求可能有效的治療藥物提供�?shí)驗(yàn)依據(jù)，也為對(duì)硫化氫的進(jìn)一步研究提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

　　2、意義及創(chuàng)新之處：

　　⑴首次研究h2s是否參與了燒傷休克早期應(yīng)激的病理生理過程。

　　⑵研究燒傷休克后血清中血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))表達(dá)的變化規(guī)律。

　�、菫閲�(yán)重?zé)齻�早期�?yīng)激過程引入新的理論機(jī)制，為燒傷抗休克治療尋找新的研究方向。

　　3、應(yīng)用前景：

　　第三種內(nèi)源性氣體信號(hào)分子h2s 越來越受到人們的廣泛關(guān)注和重視,成為當(dāng)前生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱門課題。h2s 具有多種生物學(xué)效應(yīng), 在全身多系統(tǒng)中參與了許多方面的生理及病理生理過程，揭示了某些疾病未知的發(fā)病機(jī)理，并提出了新的治療途徑，具有廣闊的研究前景和應(yīng)用價(jià)值。目前對(duì)h2s在心血管循環(huán)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)及消化系統(tǒng)等的研究已有很大的成果，但在大面積嚴(yán)重?zé)齻�病人臟器保護(hù)及與全身炎癥反應(yīng)綜合征方面的研究相對(duì)缺乏。 本實(shí)驗(yàn)旨在探討h2s對(duì)嚴(yán)重?zé)齻�后早期�?yīng)激反應(yīng)的抗休克作用，從而為臨床重度燒傷患者的疾病演變和治療提供一條新的思路。

　　四 、課題設(shè)計(jì)方案

　　包括研究工作的主要技術(shù)路線、實(shí)驗(yàn)方法或資料收集方法、統(tǒng)計(jì)處理的方法等：

　　1.主要技術(shù)路線

　　2.試驗(yàn)方法

　　1)動(dòng)物模型制備及分組

　　78只健康雄性 sd大鼠，體重 200～240 g，購于青海省地方病疾病控制中心。在大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為非燒傷組和燒傷組。燒傷組又分為單純燒傷組、nahs干預(yù)組、ppg干預(yù)組。分別設(shè)6h、12h、24h、48h組各6只，燒傷組大鼠背部脫毛并烏拉坦麻醉后，仰臥固定在燒傷模型板上，將背部裸露皮膚浸泡在95°c恒溫水箱中20秒，制成30%三度燙傷后，立即用紗布拭干水漬，腹腔注射生理鹽水40 ml/kg抗休克，自由進(jìn)食水。nahs干預(yù)組補(bǔ)液復(fù)蘇后腹腔注射硫氫化氫2ml，ppg干預(yù)組復(fù)蘇后腹腔注射ppg2ml。正常對(duì)照組大鼠予以背部剃毛及麻醉后浸入 37 cc水浴中假燙 20 s，假燙后不給復(fù)蘇補(bǔ)液 。單純燒傷組背部剃毛及麻醉后浸入95 cc水浴中燙 20 s，燙后復(fù)蘇補(bǔ)液，不給任何干預(yù)。

　　2)大鼠血壓、心率的測定。

　　各組大鼠均在6 h、12 h、24 h、48 h、96 h各時(shí)相點(diǎn)內(nèi)分別隨機(jī)選取對(duì)應(yīng)大鼠，烏拉坦(100 mg/kg)麻醉下 ，用16道生理測量儀，在頸部頸動(dòng)脈插管下測定大鼠心率、血壓。

　　3)血標(biāo)本的采集和處理。

　　各組大鼠均于取血前 12 h禁食，于6 h、12 h、24 h、48 h、96 h各時(shí)相點(diǎn)內(nèi)分別隨機(jī)選取對(duì)應(yīng)大鼠，烏拉坦(100 mg/kg)麻醉下 ，剖腹 ，直視下腹主動(dòng)脈采血 ，每只大 鼠抽血 2 ml，室溫 下靜置約 20 min后 ，XX轉(zhuǎn)離心 10 分鐘，分離出血清 ，置于 一70℃冰箱中冰凍保存，待測。

　　4)血清硫化氫及各血管活性物質(zhì)的含量測定

　　血清中血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))的含量測定采用酶聯(lián)免疫吸附(elisa)法 ，硫化氫采用比色法測定，操作均按照說明書進(jìn)行。分別記錄每時(shí)相點(diǎn)檢測血清中各個(gè)因子含量 ，比較 各組大 鼠血 清 中硫化氫及c-反應(yīng)蛋白、il-6、總體抗氧化能力的含量變化。

　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

　　采用 spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)及百分?jǐn)?shù)表示，計(jì)量資料以均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差( ±s)表示。率的比較采用卡方檢驗(yàn);不同時(shí)相點(diǎn)下各組間均數(shù)比較采用方差分析，兩組間均數(shù)的比較采用 lsd檢驗(yàn);同一時(shí)相點(diǎn)兩組間比較采用 t 檢驗(yàn) 。以 p0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義標(biāo)準(zhǔn)。

　　五、實(shí)施計(jì)劃進(jìn)度

　　XX.9---XX.10 文獻(xiàn)資料的檢索、課題預(yù)調(diào)查、撰寫綜述。

　　XX.10---XX.11 藥物置備、動(dòng)物購買、預(yù)實(shí)驗(yàn)及撰寫開題報(bào)告。

　　XX.11---XX.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。

　　XX. 1--XX.2 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測及數(shù)據(jù)整理統(tǒng)計(jì)、撰寫論文。

　　XX. 2-XX. 4 完成論文，審查論文。

　　六、預(yù)期研究成果

　　預(yù)期結(jié)果及其意義：

　　通過對(duì)大鼠燒傷后給予外源性氣體信號(hào)分子硫化氫(h2s)前后血清血管活性物質(zhì)(組胺、p物質(zhì))和大鼠心率、血壓動(dòng)態(tài)變化的對(duì)比，表明h2s參與了燒傷休克早期應(yīng)激的病理生理過程，并有一定的抗休克作用。為嚴(yán)重?zé)齻�早期休克的病理生理變化引入新的理論機(jī)制，為燒傷抗炎治療尋找新的研究方向。

　　七、估算課題工作量、完成課題的條件

　　1、儀器設(shè)備、人員配備、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、藥物試劑等：

　　(1)儀器設(shè)備:

　　95℃恒溫水浴箱;

　　高轉(zhuǎn)速離心機(jī);

　　16道生理指標(biāo)測量儀;

　　敏感硫電極;

　　722光柵分光光度計(jì);

　　酶標(biāo)儀。

　　(2)人員配置：

　　符合條件的實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)技術(shù)人員的指導(dǎo)和協(xié)助。

　　(3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

　　健康雄性sd大鼠78只，體重200～250 g，青海省地方病疾病控制中心選購。

　　(4)藥物試劑

　　硫氫化鈉(nahs)注射液;ld-炔丙基甘氨酸(ppg)注射液;烏拉坦麻醉劑;大鼠組胺(his)酶聯(lián)免疫分析試劑盒;大鼠p物質(zhì)(sp)酶聯(lián)免疫分析試劑盒;抗壞血酸(c6h8o6);氫氧化鈉(naoh);乙二胺四乙酸二鈉(edta);na2s9h2o;l-半胱氨酸;5-磷酸吡哆醛;磷酸二氫鉀;磷酸氫二鉀;三氯乙酸;三氯化鐵;醋酸鋅;對(duì)氨基二甲基對(duì)苯二胺鹽酸鹽

　　2、開展科學(xué)研究的經(jīng)費(fèi)

　　項(xiàng) 目經(jīng)費(fèi)支出(元)備 注(依據(jù)與說明)

　　一、研究經(jīng)費(fèi)

　　1、科研業(yè)務(wù)費(fèi)

　　(1)測試/計(jì)算/分析費(fèi)

　　(2)能源/動(dòng)力費(fèi)1000

　　(3)會(huì)議/差旅費(fèi)

　　(4)出版物/文獻(xiàn)信息費(fèi)500

　　2、實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)

　　(1)原材料/試劑/分析費(fèi)2650兩個(gè)個(gè)試劑盒2200元;麻醉劑450元

　　(2)其他4160實(shí)驗(yàn)大鼠、籠具及飼料

　　3、儀器設(shè)備

　　(1)購置

　　(2)試劑

　　4、實(shí)驗(yàn)室改裝費(fèi)

　　二、勞務(wù)費(fèi)

　　三、合計(jì)8310

　　說明

　　八、存在的問題及解決的辦法措施

　　1、 預(yù)計(jì)研究過程中可能遇到的困難和問題：

　　1)研究經(jīng)費(fèi)不足;

　　2)試劑質(zhì)量問題;

　　2)缺少相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備;

　　3)專業(yè)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)不足;

　　4)動(dòng)物飼養(yǎng)過程及實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的誤差;

　　5)不可預(yù)知的問題。

　　2、解決的辦法和措施：

　　1)盡量節(jié)省開支及向?qū)�師申請資金。

　　2)嚴(yán)格按照動(dòng)物飼養(yǎng)要求，每組多預(yù)備一只。

　　3)嚴(yán)格按照文獻(xiàn)記載造模并進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn);力爭掌握成熟的實(shí)驗(yàn)操作方法，并可尋求有經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的指導(dǎo)。

　　4)完善實(shí)驗(yàn)前期的準(zhǔn)備工作，參閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，找到相關(guān)的理論依據(jù)。

　　5)操作過程力求規(guī)范，檢測設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控，盡量選同一批號(hào)的試劑，藥物。

　　6)向公衛(wèi)系及高原實(shí)驗(yàn)中心尋借儀器。

【醫(yī)學(xué)碩士研究生開題報(bào)告】相關(guān)文章：

醫(yī)學(xué)開題報(bào)告12-28

醫(yī)學(xué)論文開題報(bào)告11-03

碩士研究生開題報(bào)告的思路04-27

「經(jīng)驗(yàn)」醫(yī)學(xué)論文寫作的開題報(bào)告格式04-27

開題報(bào)告04-27

開題報(bào)告05-15

開題報(bào)告格式與開題報(bào)告寫作技巧04-27

政治開題報(bào)告10-15

開題報(bào)告范文02-01

教育開題報(bào)告03-25